微生物培养基如何保存

核心原则

1. 防污染：确保容器密封良好，避免杂菌落入。

   
   

2. 防变质：避免光照、高温、氧气和湿度，这些会加速培养基成分的化学降解。

   
   

3. 防脱水：对于固态培养基（如平板和斜面），保持湿度以防止干燥开裂。

   
   

一、按培养基形态分类的保存方法

1. 商业干粉培养基

• 条件：置于阴凉、干燥、避光的地方。建议温度在 10-30°C，低温和干燥是关键。不要冷藏，因为冰箱内潮湿，取出时温差会导致干粉吸潮结块。

  
  

• 容器：保持原包装瓶或袋的密封性。开封后，应紧密盖紧瓶盖，并放入有干燥剂的密封袋中。

  
  

• 记录：在瓶身上标注购入日期和开封日期。

  
  

2. 未灭菌的液体培养基（即配好的但还未高压灭菌）

• 保存时间：应尽快灭菌，不建议长时间存放。

  
  

• 条件：如需短暂存放（如几小时或过夜），应密封后置于 4°C 冰箱，防止培养基中的营养成分被环境中杂菌利用而繁殖。

  
  

3. 已灭菌的培养基

• 液体培养基

  
  

• 条件：密封后存放于 4°C 冰箱，避光。

  
  

• 保存期：通常为 2-4 周。使用前应检查是否有沉淀、浑浊或颜色变化。对于易氧化或光敏感的成分（如染料、抗生素），保存时间应更短。

  
  

• 固体培养基 - 琼脂平板

  
  

• 包装：将倒好的平板用密封塑料袋包装，或放入有保湿水（如底部铺有湿纱布）的保鲜盒内，防止水分蒸发。

  
  

• 条件：倒置（盖在下，底在上）存放于 4°C 冰箱。倒置可以防止冷凝水滴落到培养基表面。

  
  

• 保存期：通常为 2-4 周。使用前应检查平板是否干裂、有无污染菌落。

  
  

• 固体培养基 - 琼脂斜面

  
  

• 方法：灭菌后趁热摆成斜面，凝固后拧紧试管帽（不宜过紧，以防冷却后形成负压打不开）。

  
  

• 条件：直立存放于 4°C 冰箱。

  
  

• 保存期：通常为 2-4 周。

  
  

4. 选择性/鉴别性培养基（含添加剂）

• 基本原则：基础培养基和不耐热添加剂应分开灭菌和保存。

  
  

• 保存方法：

  
  

1. 基础培养基：可按常规方法配制、灭菌后保存于4°C。

   
   

2. 不耐热添加剂（如抗生素、血清、血液）：必须严格按照说明书，通常冷冻（-20°C）或冷藏（4°C）保存，并避免反复冻融。

   
   

3. 临用前添加：在使用前，将已恢复至室温的基础培养基与添加剂在无菌操作下混合均匀。这是保证选择/鉴别效果的最佳方法。

   
   

• 保存期：添加了不耐热成分的培养基，保存期会大大缩短，通常只有几天到一周，且应严格避光冷藏。

  
  

二、保存条件总结表

三、使用前的检查

1. 物理性状：有无脱水（干裂）、颜色变化、浑浊、沉淀、凝胶强度是否正常。

   
   

2. 污染迹象：有无真菌菌落或细菌菌膜。

   
   

3. 性能验证：对于重要的实验，应使用标准菌株对保存的培养基进行质量控制和性能验证，确保其选择和鉴别能力依然符合要求。