什么是微生物培养基
更新时间:2025-10-27
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微生物培养基是一种人工配制的、含有微生物生长繁殖所必需的各种营养物质的混合物,通常为液体或凝胶状态。它可以为微生物提供一个适宜的生长环境,就像为植物提供土壤和肥料一样。
培养基的主要成分
碳源:提供微生物细胞合成有机物质的碳骨架和能量。例如:糖类(葡萄糖、乳糖)、淀粉等。
氮源:用于合成蛋白质、核酸等含氮物质。例如:蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、硝酸盐、铵盐等。
无机盐:提供必要的金属离子和微量元素,如钠、钾、钙、镁、磷、硫、铁等,它们参与细胞结构组成、酶活性的维持和渗透压的调节。
生长因子:一些微生物自身不能合成,但生长又必需的有机物质,如维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
凝固剂:常用的是琼脂(从红藻中提取)。它在95℃左右融化,40℃左右凝固,且不被大多数微生物分解,是制作固体培养基的理想材料。明胶也曾被使用,但易被某些微生物分解。
指示剂:用于显示培养基的化学变化,如酸碱指示剂(酚红、溴甲酚紫)可以判断微生物是否产酸。
抑制剂:在选择性培养基中加入,用以抑制非目标微生物的生长。例如,在分离真菌时加入抗生素以抑制细菌。
其他物质:如缓冲剂(维持pH稳定)、血液、血清等,用于培养营养要求苛刻的微生物。
培养基的主要类型(按用途和物理状态分类)
1. 按物理状态分类
液体培养基:不含凝固剂。主要用于扩增微生物的数量、进行发酵、测定生化反应等。
固体培养基:在液体培养基中加入1.5%-2.0%的琼脂凝固而成。用于微生物的分离、纯化、鉴定、计数和保藏。微生物在固体表面形成肉眼可见的菌落。
半固体培养基:琼脂含量较低(0.2%-0.5%),呈凝固不牢固的凝胶状态。常用于观察微生物的运动性、鉴定菌种和噬菌体效价测定。
2. 按化学成分分类
天然培养基:成分不明确,由化学成分不明确的天然物质制成(如牛肉膏、蛋白胨、牛奶、马铃薯等)。成本低,营养丰富,适用于实验室常规培养和工业生产。例如:牛肉膏蛋白胨培养基。
合成培养基:由化学成分和浓度已知的物质配制而成。成分精确、重复性好,主要用于微生物营养代谢、分类鉴定和科学研究。例如:高氏一号合成培养基。
半合成培养基:在天然有机物的基础上,加入部分已知成分的无机盐或糖类。兼具二者优点。
3. 按用途分类(这是最重要的分类方式)
基础培养基:含有大多数微生物生长所需的基本营养成分。如牛肉膏蛋白胨培养基,是培养细菌常用的基础培养基。
选择培养基:根据特定微生物的营养需求或对某些化学物质的抗性设计,促进目标微生物生长,抑制非目标微生物。
例子:在培养基中加入青霉素抑制细菌,从而分离真菌;或在培养基中只以纤维素为碳源,从而筛选能分解纤维素的微生物。
鉴别培养基:在培养基中加入特定指示剂或化学物质,使不同微生物在生长后呈现出肉眼可辨的差异(如菌落颜色变化),用于快速鉴别和区分微生物。
最著名的例子:伊红美蓝培养基,用于鉴别大肠杆菌。大肠杆菌会发酵乳糖产酸,形成带有金属光泽的紫黑色菌落。
富集培养基:在培养基中加入某些特殊营养物质,使样品中少数目标微生物快速繁殖,成为优势菌群,从而更容易被分离出来。它通常也具有选择性。
厌氧培养基:专用于培养厌氧菌,通常会加入还原性物质(如巯基乙酸钠)以去除培养基中的氧气,并提供无氧的培养环境。
培养基的重要性与应用
基础研究:研究微生物的形态、代谢、遗传和致病机理。
食品和水质检测:检测食品和饮用水中的致病菌或指示菌(如大肠菌群),确保安全。
工业生产:用于生产抗生素、疫苗、酶制剂、氨基酸、有机酸等产品。
环境监测:分离和评估环境中的特定功能微生物,如降解污染物的细菌。